柔嫩艾美耳球虫TA4抗原基因cDNA在乳酸乳球菌中的克隆与表达

摘要

用PCR技术特异扩增了柔嫩艾美耳球虫TA4抗原基因cDNA序列,克隆至质粒pMD18-T中,获得重组质粒pMD18-T-TA4,采用Kpn Ⅰ/Sac Ⅰ双酶切法及PCR确认正确后,将TA4基因cDNA目的片段亚克隆到乳酸乳球菌表达载体pMG36n中,电穿孔法转化乳酸乳球菌LM0230,获得重组质粒pMG36n-TA4,采用Kpn Ⅰ/Sac Ⅰ双酶切法及DNA测序证明cDNA序列完全正确.获得TA4乳酸乳球菌表达株,经SDS-PAGE电泳分析,结果表明表达产物与预期大小的TA4蛋白分子量一致.