绿色荧光示踪马传染性贫血病毒样颗粒在活细胞中的组装过程

摘要

马传染性贫血病毒(EIAV) gag基因编码的多聚Gag蛋白能够自动组装形成病毒样颗粒(VLPs).为研究EIAV衣壳蛋白合成、组装及释放过程,本实验通过构建表达EIAV Gag-GFP融合蛋白重组质粒,并将其转染293T细胞,采用western blot检测不同时间点VLPs的产生及释放.并进一步通过活细胞和3D成像技术观察Gag-GFP在细胞中的表达动态及VLPs的组装过程.结果表明:Gag和GFP蛋白融合表达不影响VLPs的组装,转染约6h后EIAV Gag蛋白进行合成并在细胞胞质聚集完成组装形成VLPs.该实验结果为进一步研究EIAV在细胞中的组装路线和机制奠定了重要基础.