嗜酸乳杆菌表面锚定展示H5N1亚型禽流感病毒血凝素HA1蛋白的研究

摘要

为研究乳酸茵载体细胞表面锚定结合展示外源蛋白,本研究将禽流感病毒(AIV) H5N1亚型血凝素HA1基因克隆于pET-28a载体中,同时PCR扩增编码S-层蛋白的锚定区域基因Slap-C,并插入HA1基因下游构建重组表达质粒pET-HA1-Slap,转化于E.coli BL21中进行HA1-Slap融合蛋白的表达,SDS-PAGE检测显示表达的HA1-Slap主要以包涵体形式存在.融合蛋白经镍柱纯化、透析复性,与氯化锂处理的嗜酸乳杆菌混合孵育,SDS-PAGE和间接免疫荧光检测表明HA1-Slap锚定结合并展示于嗜酸乳杆菌细胞壁表面,并且具有良好的稳定性.本研究结果证明了嗜酸乳杆菌细胞壁表面展示AIV的HA1抗原蛋白的可行性,为新型乳酸菌载体黏膜免疫疫苗的研究奠定基础.