O1血清群霍乱弧菌在甲鱼体表定殖模式的建立及与O139血清群霍乱弧菌定殖能力比较

摘要

目的分析01血清群霍乱弧菌在甲鱼体表的定殖能力,并比较01与0139血清群霍乱弧菌菌株在甲鱼体表定殖能力的差异。方法所用01及0139血清群霍乱弧菌均为中国疾病预防控制中心传染病预防控制所腹泻病室保存,各4株。实验用甲鱼选择背甲直径约9 cm、体重约150 g的甲鱼,共63只。利用小动物活体成像直接观察生物发光标记的01血清群霍乱弧菌菌株在甲鱼体表的定居部位及增殖;构建01血清群霍乱弧菌主要定居因子的基因缺失株（mshA,gbpA,tcpA基因）,通过竞争定殖实验计算竞争定殖系数（CI）,分析O1血清群霍乱弧菌在甲鱼体表定殖的主要决定因子;对01及0139血清群霍乱弧菌两两配对,组成16个竞争组,通过竞争定殖实验比较两种血清群霍乱弧菌在甲鱼体表定殖能力的差异。结果 01血清群霍乱弧菌在甲鱼体表的定殖具有位置聚集性,以甲鱼背部裙边和背甲定殖最强,腹甲定殖很少。竞争定殖实验显示,mshA基因缺失后,01血清群霍乱弧菌在甲鱼体表的定殖能力下降了7.26倍。16个竞争组中有11组的CI值（0139/01）大于2,在2.07～59.84之间;有2组分别为1.43及0.93;有3组的CI值低于0.7。结论确定了霍乱弧菌在甲鱼体表的定殖部位;mshA基因为01血清群霍乱弧菌在甲鱼体表定殖时发挥作用的主要定居因子;0139血清群菌株比01血清群菌株有更强的定殖优势,且直接分离自甲鱼的菌株定殖能力更强。