聚合酶链反应技术在无菌性脑膜炎和脑炎病原诊断中的应用探讨

摘要

目的提高无菌性脑膜炎和脑炎病原早期诊断的敏感性和特异性.方法分别设计针对肠道病毒(EV)5'UTR、Ⅰ型和Ⅱ型单纯疱疹病毒(HSVⅠ,Ⅱ)糖蛋白D基因、人巨细胞病毒(CMV)立即早期蛋白基因、EBV核抗原1基因和肺炎支原体(MP)ATPase操纵子基因的巢式PCR引物,应用巢式-聚合酶链反应(nested-PCR)技术检测无菌性脑膜炎和脑炎患儿的脑脊液标本中EV、Ⅰ型和Ⅱ型HSV、CMV、EBV及MP.结果所用不同病原体的引物之间无交叉反应,特异性高.收集到的158例脑脊液标本中有102例(64.6%)检测到病原,包括42例EV(42/158,26.6%),27例HSV Ⅱ(27/158,17.1%),16例EBV(16/158,10.1%),8例MP(8/158,5.1%),6例CMV(6/158,3.8%),3例HSV Ⅰ(3/158,1.9%).这些阳性标本中有10例检测到2种或3种病原.结论 PCR技术在无菌性脑膜炎和脑炎病原的早期诊断中有潜在的应用价值,可在中枢神经系统感染的病原鉴别中作为一种辅助性实验室诊断为临床诊治提供参考依据.