粗壮女贞总苷降血脂作用及其基于AMPK通路的降脂作用机制

摘要

目的探讨粗壮女贞(CN)总苷降血脂作用及其基于腺苷酸活化蛋白激酶(AMPK)通路的降脂作用机制。方法Syrian金黄地鼠随机分为正常组、高脂模型组,阳性药非诺贝特组及CN总苷高、中、低剂量组。除正常组外,其余各组地鼠应用高脂饲料诱导建立混合型高脂血症模型。造模1周后取血,检测血清总胆固醇(TC)、甘油三酯(TG)、低密度脂蛋白-胆固醇(LDL-C)、高密度脂蛋白-胆固醇(HDL-C)含量,确定模型形成。之后连续给药30 d,在给药10,20及30 d分别取血检测血清中TC,TG,LDL-C,HDL-C及游离脂肪酸(FFA)含量。在给药30 d后剖取肝测定肝TG和TC含量。并应用实时定量PCR检测CN总苷对肝中AMPK、CD36、肉毒碱棕榈酰转移酶1(CPT1)、乙酰辅酶A羧化酶(ACC)的m RNA表达水平的影响;并用Western blotting法检测AMPK和其上游调控蛋白肝激酶B1(LKB1)的磷酸化蛋白和总蛋白水平,并检测羟甲基戊二酸单酰辅酶A(HMG-Co A)还原酶的蛋白表达量。结果给药10,20及30 d后,与模型组相比,CN总苷高剂量组血清中的TC,TG,LDL-C和FFA含量均显著降低(P<0.01);给药30 d后肝中TC和TG含量极显著降低(P<0.01)。实时定量PCR结果显示,与模型组相比,CN总苷可以明显升高AMPK的相对表达量(P<0.01),但CD36,ACC和CPT1的相对表达量无明显变化。Western蛋白印迹结果显示,与模型组相比,CN总苷高剂量组肝中的LKB1,phospho-LKB1及phospho-AMPK的相对表达量均提高,其中phospho-LKB1相对表达量显著提高(P<0.01)。结论 CN总苷能有效降低高脂血症金黄地鼠的血脂和肝脂水平,其机制可能是CN总苷促进肝LKB1磷酸化从而激活AMPK通路上与脂质代谢相关的靶蛋白。