Connexin43通过SIRT1-HIF1-α通路改善糖尿病肾小管间质纤维化的研究

摘要

目的研究Connexin 43(Cx43)影响糖尿病状态下肾小管上皮细胞间充质转分化(EMT)以及肾小管间质纤维化的病理进程及其作用机制。方法采用db/db自发性糖尿病小鼠模型,通过尾静脉注射Cx43腺病毒过表达载体,观察糖尿病动物肾病理改变及肾功能指标的变化并检测Cx43、E-cadherin等EMT标志分子、FN等细胞外基质(ECM)成分等以及SIRT1,HIF1-α的表达变化;采用高糖培养的NRK-52E细胞,应用Cx43过表达或shRNA或分别转染野生型Cx43质粒、羧基末端缺失型Cx43ΔCT质粒和只表达Cx43羧基末端Cx43CT质粒等方法处理,检测Cx43、EMT标志分子、ECM成分、SIRT1与HIF1-α的表达变化,以及对HIF1-α活性的影响。结果在db/db糖尿病模型小鼠的肾脏以及高糖培养的NRK-52E中,Cx43表达下调;对db/db小鼠进行尾静脉注射Cx43过表达腺病毒,能改善其肾损伤,减少EMT标记物以及ECM成分的产生,并能上调SIRT1、降低HIF1-α的表达。在高糖培养的NRK-52E中过表达Cx43抑制高糖刺激诱导的EMT过程,减少ECM成分表达;干扰Cx43促进EMT过程,增加ECM成分表达;Cx43对EMT的影响主要通过其羧基端上调SIRT1表达,增强SIRT1对HIF1-α的去乙酰化作用,降低HIF1-α的活性,从而抑制糖尿病状态下肾脏EMT及肾小管间质纤维化。结论Cx43通过其羧基端上调SIRT1表达,增强SIRT1对HIF1-α的去乙酰化作用,降低HIF1-α的活性,从而改善糖尿病状态下肾脏EMT及肾小管间质纤维化。