小半夏汤通过调节Gasdermin E改善大鼠化疗性异食癖

摘要

目的 建立化疗性异食癖大鼠模型,观察小半夏汤对化疗大鼠Gasdermin E(GSDME)表达水平的影响,从GSDME介导的细胞焦亡角度探讨小半夏汤防治化疗性恶心呕吐的作用机制.方法 将Wistar大鼠随机分为正常对照组、顺铂模型组、昂丹司琼(2.6 mg·kg-1)组和小半夏汤治疗(3.2 g·kg-1)组;首次ig给药1 h后,除正常对照组外,其余各组ip给予顺铂(6 mg·kg-1)建立大鼠化疗性异食癖模型,以大鼠高岭土摄食量作为其恶心呕吐程度指标,每24 h记录大鼠的高岭土摄食量.连续给药3 d,造模72 h后取血和胃窦.采用ELISA方法测定血清中IL-1β,IL-18,HMGB1含量;HE染色观察组织病理情况;实时荧光定量PCR测定各组大鼠胃窦GSDME的mRNA表达水平;Western印迹法测定大鼠胃窦胱天蛋白酶3、活化胱天蛋白酶3,GSDME和GSDME-N蛋白的表达.结果 ①与正常对照组比较,造模后24和72 h内模型组大鼠的高岭土累积摄食量均显著增加(P<0.01),成功建立大鼠异食癖模型;与模型组比较,造模后24和72 h内小半夏汤治疗组和昂丹司琼治疗组高岭土摄食累积量均显著降低(P<0.05,P<0.01).②HE染色结果显示,与正常对照组比较,顺铂模型组胃窦组织上皮表面严重破坏,固有层腺体排列疏松、紊乱,固有层腺体嗜酸性增强,可见明显炎性浸润.与顺铂模型组相比,昂丹司琼治疗组和小半夏汤治疗组可显著改善胃窦组织损伤,且小半夏汤治疗组损伤程度小于阳性药组,但不及正常对照组.③实时荧光定量PCR结果显示,与正常组比较,模型组大鼠胃窦GSDME mRNA表达显著升高(P<0.01);与模型组比较,小半夏汤治疗组胃窦GSDME mRNA表达显著降低(P<0.01).④Western印迹法结果显示,与正常组比较,模型组大鼠胃窦的活化胱天蛋白酶3、GSDME-N显著升高(P<0.01);与模型组比较,小半夏汤组胃窦的活化胱天蛋白酶3和GSDME-N显著降低(P<0.01).⑤ELISA结果显示,与正常组比较,模型组大鼠血清中IL-1β,IL-18和HMGB1含量显著升高(P<0.01);与模型组比较,小半夏汤组血清中IL-1β,IL-18和HMGB1含量均显著降低(P<0.01).结论 小半夏汤可以通过抑制胃窦GSDME的表达和切割,减少化疗导致的胃窦组织细胞焦亡,从而改善化疗性恶心呕吐.