组蛋白去乙酰化酶抑制剂DWP0016对肺癌A549细胞和小鼠Lewis肺癌的抑制作用

摘要

目的 探讨新型组蛋白去乙酰化酶(H DAC)抑制剂DWP0016对肺癌的抑制作用及可能机制.方法 ①体外实验:DWP0016 0.625～10 μmol·L-1作用A549细胞48 h,MTT法检测细胞存活,实时荧光定量PCR检测10号染色体同源丢失性磷酸酶张力蛋白(PTEN) mRNA水平;Western蛋白质印迹法测定总组蛋白H3,乙酰化H3(Ac-H3),细胞周期调控因子p21,PTEN,总Akt和磷酸化Akt (p-Akt)的表达.②在体实验:小鼠腋下接种0.2 ml Lewis肿瘤细胞悬液制备肺癌模型,7d后按照分组分别ip给予DWP001612.5,25和50 mg· kg-1及伏林司他(SAHA)50 mg· kg-1,每天1次,连续8d.取肿瘤组织称重,计算肿瘤抑制率;免疫组化法检测肿瘤组织中Ac-H3和PTEN的表达.结果 ①体外实验:MTT结果显示,DWP0016抑制A549细胞增殖的IC50为2.51 μmol·L-1,SAHA IC50为6.03 μmol·L-1.与正常对照组相比,DWP0016 2.5 μmol· L-1组细胞组蛋白H3乙酰化及p21蛋白表达显著上升(P＜0.05),PTEN的转录水平和蛋白水平上调,Akt的磷酸化水平下调(P＜0.05).②在体实验:与模型组比较,给予DWP001612.5 mg·kg-1移植瘤小鼠的瘤质量显著降低(P＜0.05),抑瘤率达42.0％,给予DWP0016 50 mg·kg-1肿瘤抑制率高于SAHA 50 mg·kg-1 (P＜0.05);与模型组比较,肿瘤组织中Ac-H3和PTEN的表达增加.结论 DWP0016能明显抑制A549细胞增殖和Lewis肺癌模型小鼠的肿瘤生长,其机制与诱导Ac-H3的表达、激活p21、促进抑癌因子PTEN的转录及下调Akt的磷酸化水平有关.