多药耐药基因转染小鼠骨髓细胞及在化疗中骨髓保护的研究

摘要

目的探讨多药耐药基因(mdr1)对骨髓细胞在化疗中的保护作用,寻找一种防治化疗中抗癌药物所致骨髓抑制的有效方法.方法以小鼠骨髓细胞为靶细胞,通过逆转录病毒介导,采用mdr1表达质粒PHamdr1/A,将mdr1基因转入骨髓细胞.并通过将转染mdr1基因的骨髓细胞回输入同种小鼠体内的骨髓移植动物模型,观察了移植小鼠对抗癌药物的对抗性.同时分别采用PCR技术、免疫组化和柔红霉素排泄试验检测mdr1基因在小鼠体外及体内的表达和功能.结果①成功地将mdr1基因导入小鼠骨髓细胞之中,转染率达到35%;②采用程序性移植方法成功建立了mdr1转基因鼠骨髓移植模型;③ mdr1基因转染的骨髓细胞在化疗中有明显的骨髓保护作用,对紫杉醇耐受性高于正常6倍,对环磷酰氨耐受高于正常6～7倍;④ PCR、免疫组化、柔红霉素排出试验证实mdr1基因在体内有有效整合及表达.结论 mdr1基因转染骨髓细胞在化疗中可保护骨髓细胞免受抗癌药物的损伤.