脂联素阻断游离脂肪酸介导的单核细胞TLR4信号途径的激活

摘要

目的:研究脂肪细胞分泌产物脂联素及游离脂肪酸作用于单核细胞的信号转导途径,探讨脂肪细胞与单核细胞间相互作用的分子机制.方法:收集人单核细胞体外培养,加入终浓度分别为0.1、0.5、1.0 mmol/L硬脂酸(stearic acid,SA),24 h后收集上清液,ELISA法检测上清液肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor alpha,TNF-α)、白细胞介素-6(interleukin-6,IL-6)浓度;上述浓度SA刺激单核细胞2 h后,免疫组化检测单核细胞核转录因子κB(nucleartranacriptionfactor κB,NF-κB)核移位;加入不同浓度脂联素球状结构域(globular adipone-ctin,SAd)孵育单核细胞6 h,SA刺激,2 h后检测NF-κB核移位变化,24 h后检测上清液TNF-α、IL-6浓度.不同浓度gAd孵育单核细胞24 h后用流式细胞术检测Toll样受体4(Toll-llke receptors 4,TLR4)数目的变化.结果:SA刺激单核细胞可引起NF-κB核移位及TNF-α、IL-6分泌增加,gAd可阻断SA这一效应.gAd解育单核细胞可导致TLR4数目显著下调.结论:脂肪细胞分泌SA及脂联素通过TLR4调节单核细胞活性,脂联素通过TLR4阻断SA对单核细胞的激活作用.