ERβ通过抑制SOST表达补偿ERα部分功能促进对成骨细胞增殖分化

摘要

目的 观察ERα和ERβ调控前体成骨细胞增殖和分化中的相互作用及当ERα表达降低时,ERβ的激活能否通过抑制SOST信号传递补偿ERα部分功能调控成细胞增殖.方法 利用RNA干扰技术,以小鼠前体成骨细胞株MC3T3-E1为对象,采用随机分层设计的对照研究,将细胞随机分层设计分组为4个组,根据研究需要再将相关组再进一步分为7个亚组,进行相关干预处理.检测各组细胞周期、MTT法绘制细胞生长曲线、检测SOST、OPG和RunX2等细胞因子的表达.应用SPSS16.0进行统计分析各组间差异,显著性差异定为P＜0.05.结果 ERα表达正常,单独沉默ERβ的表达(D组),细胞增殖稍增加,但与空白对照组(F组)比较,没有显著性差异,P＞0.05.同时沉默ERα和ERβ(E组),细胞增殖明显减少,SOST基因表达反而增强,但是OPG和RunX2的表达相对于空白对照组显著减弱,与空白对照组和B组比较,有显著性差异,P＜0.05.沉默ERα表达而保持ERβ正常表达(B组),成骨细胞增殖能力明显减弱,SOST基因表达减弱,OPG和RunX2的表达相对于空白对照组明显减弱,和空白对照组比较差异有显著性P ＜0.05.相反,沉默ERα表达,但应用ERβ激动剂使ERβ过表达(A组),与B组和E组比较,细胞增殖能力反而明显增强,但是SOST基因表达显著降低,OPG和RunX2的表达反而升高,有显著性差异,P ＜0.05.在E组细胞的培养液中加入SOST抗体(G组),和E组比较,OPG和RunX2蛋白表达明显增强,两组间差异有显著性,P＜0.05;这一结果与A组中应用ERβ激动剂有相似作用.结论 ERβ对ERα调控成骨细胞增殖过程中起着平衡作用,当ERα正常表达或活性增高时,ERβ抵抗ERα在骨形成中的刺激作用;当ERα活性减弱或丧失后,ERβ的激活补偿ERα刺激成骨细胞的增殖和分化,并且这一过程是通过ERβ抑制SOST表达而增强成骨细胞增殖相关细胞因子OPG和RunX2等而独立发挥作用.