骨肉瘤细胞与活化B淋巴细胞融合疫苗的制备及其诱导的抗瘤活性

摘要

目的骨肉瘤细胞与活化B淋巴细胞融合制备肿瘤疫苗,探讨其生物学特征及抗肿瘤特性.方法以体积分数50%的聚乙二醇(PEG)为融合剂,将C3h小鼠来源的次黄嘌呤鸟嘌呤磷酸核糖转移酶(HGPRT)基因缺陷型骨肉瘤细胞LM9与脂多糖(LPS)活化的C3h小鼠B淋巴细胞进行融合.经HAT(hypoxanthine-aminopyerin-thymidine)选择性培养基筛选后,流式细胞仪检测融合细胞表面H-2Kb表达情况,用有限稀释法进行克隆,H-2Kb高表达株(FLM9)用于体内抗瘤实验,观察该融合瘤株的体内外生长特性、对C3h小鼠的致瘤性以及抗肿瘤免疫活性.结果C3h小鼠骨肉瘤融合细胞在体外生长缓慢,对C3h小鼠无致瘤性,经有限稀释法克隆得到一个B7表达为75.11%的克隆,该克隆H-2Kb表达为15.6%;作用于荷瘤C3h小鼠,融合细胞治疗组小鼠(8只)2只分别于38d和45d死亡,其余6只存活期超过60d;对照组小鼠均在60d内全部死亡(P<0.01).用肿瘤细胞攻击时，预先接种融合瘤苗组的存活率75%，明显高于对照组。结论活化B淋巴细胞与骨肉瘤细胞融合后改变了肿瘤细胞的生物学特性，对小鼠有较好的预防和治疗肿瘤作用，说明用细胞融合方法构建的肿瘤疫苗具有潜在的应用价值。