β-伴大豆球蛋白α'亚基和β亚基基因双价RNAi表达载体抑制大豆抗原蛋白的表达

摘要

为幼龄动物提供优质的大豆饲料,同时有效抑制α'亚基和β亚基基因表达量,根据dsRNAi原理,以α '亚基基因RNAi重组植物表达载体pCAMBIA3301-PFNZ-BADH为基础,构建以BADH安全标记为筛选标记的α '亚基和β亚基基因双价RNAi植物表达载体.用根癌农杆菌介导法转化大豆子叶节,并对再生植株进行分子生物学检测.结果表明:成功构建β-伴大豆球蛋白α '亚基和β亚基基因双价RNAi表达载体,并获得大豆转基因植株.T1转基因大豆植株经PCR检测得到1 1株阳性转化株,经Southern杂交检测证明构建的双价植物表达载体已经以1～2个拷贝整合到大豆基因组中,实时荧光定量PCR检测表明β-伴大豆球蛋白α'亚基和β亚基基因的表达被明显抑制.