靶向Bmi-1基因的siRNA脂质复合物的制备及体外对乳腺癌MCF-7的抑制作用

摘要

目的:制备装载靶向Bmi-1基因的siRNA脂质复合物(PILP)并考察其体外对乳腺癌MCF-7细胞增殖的抑制作用、转染效率及对Bmi-1 mRNA表达的影响.方法:以磷脂、胆固醇、DSPE-PEG2000和DSPE-PEG2000-maleimide为类脂成分,逆向蒸发法制备载siRNA的肿瘤靶向脂质复合物.激光纳米粒度仪测定脂质复合物的粒径和电位,凝胶电泳测定其对siRNA的包封率,MTT法检测脂质复合物对MCF-7细胞体外增殖的抑制,荧光显微镜观察脂质复合物中siRNA被MCF-7细胞摄取的情况,流式细胞仪检测转染效率,RT-PCR法检测其对MCF-7细胞中Bmi-1 mRNA表达的影响.结果:制备的载siRNA的肿瘤靶向脂质复合物粒径为(122.7±1.7) nm、电位为(-22.74±0.96)mV,对siRNA的包封率高;能显著抑制MCF-7细胞的体外增殖(P＜0.05),作用72 h抑制率为(55.36±3.5)％;其装载的siRNA能被MCF-7细胞有效摄取,转染效率为97.07％;能有效沉默MCF-7细胞中Bmi-1 mRNA,沉默效率为69.5％.结论:采用该方法可制备包封率较高的肿瘤靶向脂质复合物,其介导的siRNA能有效抑制乳腺癌MCF-7细胞的体外增殖、转染效率高、能有效沉默MCF-7细胞中Bmi-1 mRNA.