灭活CVB1-TfpL-DNA复合物在原代骨骼肌细胞中的基因转移研究

摘要

目的研究灭活柯萨奇病毒B1-转铁蛋白聚赖氨酸-DNA(CVB1-TfpL-DNA)复合物在原代培养骨骼肌细胞中基因转移效率.方法用聚乙二醇沉淀和蔗糖低温超速离心法提纯并用β-丙内酯灭活病毒,生物素法构建灭活CV据-TfpL-DNA复合物,观察大鼠离体培养骨骼肌细胞中报告基因(LacZ)产物β-半乳糖苷酶(β-gal)染色阳性的细囊数.结果在骨骼肌细胞中,灭活CVB1-TfpL-DNA复合物使基因转移效率由TfpL+DNA组的1%提高到25%～30%.结论CVB1的嗜肌肉特性为在DMD等肌萎缩症的基因治疗中探索靶向载体提供了实验依据.