中国株白喉杆菌毒素全基因编码序列的克隆

摘要

本实验从我国自己分离的白喉杆菌噬菌体中成功地克隆了白喉毒素的全基因。此基因克隆是以自己设计合成的寡核苷酸为引物，以Ｂ棒状噬菌体ＤＮＡ为模板，用热启动聚合酶链反应（ＰＣＲ）一次扩增出全基因编码序列。该基因全长共１６０５个碱基对。将ＰＣＲ产物直接克隆到ｐＧＥＭ－Ｔ／载体系统，经有关限制性内切酶消失，核苷酸序列分析并与已知序列比较，结果表明，所获白喉毒素基因的序列与已知序列基本一致，仅有个别碱基位点的差