RSV感染诱导的RANTES、FKN、IP-10表达及PPARγ激动剂抑制作用的体外研究

摘要

目的研究A549细胞呼吸道合胞病毒（RSV）感染12 h、24 h、48 h后调节激活正常T细胞表达和分泌细胞因子（RANTES）、分形趋化因子（FKN）、干扰素诱导蛋白-10（IP-10）mRNA和蛋白水平的变化及不同剂量过氧化物酶体增殖物激活受体γ（PPARγ）激动剂15-脱氧前列腺素J2（15dPGJ2）和罗格列酮及其拮抗剂（GW9662）的干预作用。方法建立RSV感染A549细胞的体外模型,将传代培养的细胞随机分成5组:A组（15d-PGJ2+RSV组）,B组（罗格列酮+RSV组）、C组（DMSO+RSV组）、D组（GW9662+罗格列酮+RSV组）、E组（细胞对照组）。各组分别在培养12 h、24 h、48 h收获细胞及上清液待测。应用ELISA检测各组上清液RANTES、FKN、IP-10蛋白水平,实时荧光定量RT-PCR检测各组RANTES、FKN、IP-10 mRNA表达。结果与细胞对照组相比,RSV感染组RANTES、FKN、IP-10 mRNA和蛋白的表达在12 h、24 h和48 h均明显升高（P均＜0.05）,其中RANTES、FKN、IP-10 mRNA的表达量在24 h达高峰,48 h有所下降,与12 h的表达量比较差异无统计学意义（P均＞0.05）;而3种趋化因子蛋白的表达量均在48 h达高峰,与12 h、24 h比较差异有统计学意义（P均＜0.05）。在同一作用时间点上,随着15d-PGJ2和罗格列酮药物浓度的增加,RANTES、FKN、IP-10 mRNA和蛋白的表达量均呈剂量依赖性下降,与RSV感染组相比差异有统计学意义（P均＜0.05）,其中以20μmol/L15d-PGJ2和30μmol/L罗格列酮干预后RANTES、FKN和IP-10 mRNA和蛋白的表达量最低。结论RSV感染可导致RANFES、FKN和IP-10 mRNA及蛋白表达升高,其中mRNA水平在感染后24 h达到高峰,蛋白的表达自感染后48 h达到高峰;而PPARγ激动剂能以剂量依赖性方式抑制上述趋化因子mRNA和蛋白的表达,从而起到减轻炎症的作用。