家蝇天蚕素抗菌肽Cec4对鲍曼不动杆菌抑菌活性的研究

摘要

目的通过化学合成家蝇抗菌肽Cec4,以鲍曼不动杆菌为指示菌,研究其抑菌活性。方法采用微量稀释法测定最小抑菌浓度（minimal inhibitory concentration,MIC）、最小杀菌浓度（minimal bactericidal concentration,MBC）,酶标仪动态监测家蝇抗菌肤Cec4对细菌生长的影响并绘制时间-杀菌曲线（time-kill curve）,评估NaCl、胰蛋白酶、pH值等不同因素对Cec4抑菌活性的影响,并通过扫描电镜观察（scanning electron microscope,SEM）Cec4对细菌微观结构的破坏程度。结果家蝇抗菌肽Cec4对鲍曼不动杆菌MIC和MBC分别是4μg/ml、8μg/ml。Time-kill curve结果显示,抗菌肽Cec4在24 h内都具有较高抗菌效力。不同NaCl离子强度（0～200 mmol/L）条件下,对Cec4抗菌活性几乎无影响。高浓度胰蛋白酶1.0mg/ml会抑制Cec4抗菌活性。不同的pH值（6.5、7.5、8.8）条件下,溶液中Cec4抗菌活性最适pH值为8.8。SEM结果显示对细菌细胞损伤程度与作用时间呈正相关。结论本研究新发现的家蝇抗菌肽Cec4对鲍曼不动杆菌具有较好抑菌活性,能在较短的时间内清除鲍曼不动杆菌,其抗菌能力持续24 h以上。在钠离子强度、胰蛋白酶、pH值等不同影响因素作用下,家蝇抗菌肽Cec4都具较好稳定性。电镜观察发现家蝇抗菌肽Cec4能破坏细菌膜的完整性,致使其内容物大量外泄,最后导致死亡。基于上述结果,将进一步研究家蝇抗菌肽Cec4对鲍曼不动杆菌的抗菌机制。