GPR30-PI3K/Akt信号通路在三阴性乳腺癌转移中作用的体外研究

摘要

目的 探讨GPR30-PI3K/Akt信号通路在三阴性乳腺癌转移中的作用机制.方法 采用Western blotting检测4种乳腺癌细胞系中GPR30蛋白的表达情况和不同药物作用后MDA-MB-468细胞中p-PI3K蛋白的表达变化;应用免疫荧光法检测GPR30在三阴性乳腺癌细胞MDA-MB-468中的定位;通过划痕实验检测GPR30-PI3K/Akt信号通路对细胞迁移能力的影响.结果 ①三阴性乳腺癌细胞系MDA-MB-468可高表达GPR30,后续确定选用MDA-MB-468细胞作为研究对象.②在MDA-MB-468细胞中,GPR30主要定位于胞质和胞膜上.③p-PI3K蛋白的表达水平随着GPR30激动剂(E2和G1)浓度及作用时间的增加而增高,具有浓度及时间依赖性(P＜0.05);而使用GPR30特异性阻断剂(G15)处理细胞后,p-PI3K蛋白表达水平显著降低(P＜0.05).④经E2及G1处理后,MDA-MB-468细胞迁移能力显著增强(P＜0.05),而G15及PI3K抑制剂(LY294002)处理后其迁移能力明显减弱(P＜0.05).结论 在三阴性乳腺癌中,GPR30与PI3K/Akt信号通路之间可能存在某种交叉关系并参与三阴性乳腺癌的转移进程.