声诺维联合超声介导视网膜色素上皮细胞基因转染的辐照条件优化研究

摘要

目的 探讨微泡造影剂声诺维联合超声介导绿色荧光蛋白质粒转染人视网膜色素上皮(RPE)细胞的最佳辐照条件.方法 人RPE细胞培养在24孔板,质粒用量为2 μg/孔,分为不处理组、质粒+超声辐照组、造影剂浓度组、超声声强组、辐照时间组、声波形式组6组,每组5个细胞孔数,超声探头紧贴培养板底部辐照,72 h后流式细胞仪测基因转染率,四甲基偶氮唑蓝法(MTT)测细胞活性.结果 处理组转染率均大于不处理组(P＜0.05).加入浓度为20%的造影剂,以1 W/cm2,50 Hz、100 Hz的脉冲波和连续波分别辐照1 min,细胞生存率逐渐下降.20%的造影剂,50 Hz的脉冲波,声强为3 W/cm2,辐照1 min组转染率最高(20.88±3.74)%,而细胞生存率为82.57%.20%的造影剂,50 Hz的脉冲波,声强为2 W/cm2,辐照1 min组转染率为(15.73±2.52)%,细胞生存率为91.32%.结论 20%的造影剂,2 W/cm2,50 Hz脉冲波辐照1 min是RPE细胞基因传染的最佳辐照条件.