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荧光探针Fluo-3/AM和FuraRed 测量单细胞中比率钙

     

摘要

应用ACAS570激光扫描共聚焦显微镜(laserscanningconfocalmicroscope,LSCM简称共焦显微镜)和钙离子指示剂Fluo-3/AM、FuraRed荧光探剂双标记技术,测定了单个活细胞内比率钙的动态变化。结果显示37℃,Fluo-3/AM浓度10μmol/L,FuraRed浓度10μmol/L的条件下,昆明小鼠巨噬细胞负载1h左右即可获良好的标记效果。用比率探针测量细胞内Ca^2+的动态变化,使Ca^2+的定性定量测定不受染料浓度、细胞大小、照射光强度以及一定程度的光漂白和染料泄漏等因素的影响,提供了一种准确定性定量细胞内Ca^2+的实时、动态、原位变化的新方法。

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