用生物素标记探针和链亲和素磁珠分离HLA-A、-B、-C位点单体型

摘要

茸的建立生物素标记探针和链亲和素磁珠分离人类白细胞抗原（human leukocyte antigen,HLA）-A、-B、-C单体型的技术,以解决HLA分型过程中部分模棱两可的结果。方法根据IMGT/HLA数据库中HLA等位基因的序列信息,设计5’端生物素标记探针。将探针与104份标本基因组DNA混合杂交,然后加入链亲和素磁珠孵育,形成链亲和素磁珠-生物素探针-单链DNA复合物,通过洗涤和解析从而实施有效的分离。对分离出的单体型基因组DNA进行HLA-A、-B或-C位点扩增和测序分析。结果设计的12个HLA-A、19个HLA-B、13个HLA-C位点探针中,经测序证实分别有9个、9个、5个探针成功分离了单链DNA标本。结论建立的探针和磁珠分离HLA-A、-B、-C单体型技术具有可行性,可以解决HLA测序分型中部分模棱两可结果,提高分型的准确性。