肽刺激培养法体外扩增巨细胞病毒特异细胞毒性T淋巴细胞

摘要

目的研制一种扩增特异细胞毒性 T 淋巴细胞频数的方法。方法用不同浓度的巨细胞病毒（CMV）特异的表位肽 pp65刺激人外周血单个核细胞（PBMCs）使 CMV 特异 CTLs 在 PBMCs中的百分比增高。用四聚体-PE 和 CD8-FITC 双标记 PBMCs 中的 CMV 特异 CTLs,然后用流式细胞仪分析。结果这个方法能有效扩增 CMV 特异 CTLs,使在外周血中占淋巴细胞百分比不到1%的CMV 特异 CTLs 迅速增加到接近20%,占 CD8+T 淋巴细胞的40%以上,并能从单份血样中获得大量特异 CTLs 用于流式分析。结论肽刺激培养法简便、易操作,能有效扩增 CMV 特异 CTLs,使不同人的数据更容易对比和连续的评价。该方法也为过继性免疫疗法治疗巨细胞病毒疾病打下了基础。