基于测序分析的新生儿葡萄糖-6-磷酸脱氢酶缺乏症分子诊断与基因新突变鉴定

摘要

目的探讨分子诊断技术在新生儿葡萄糖-6-磷酸脱氢酶（G6PD）缺乏症诊断中的应用,鉴定G6PD基因新的突变位点。方法收集重庆医科大学附属儿童医院新生儿疾病筛查中心2013年12月至2014年6月新生儿G6PD缺乏症筛查阳性的患儿231例,采用PCR和Sanger测序法对新生儿G6PD缺乏症筛查阳性的患儿进行G6PD基因突变检测,以期明确本地区的突变热点;通过对筛查阳性标本G6PD活性比值法检测结果与分子诊断结果的比较,分析酶学表型与基因型的关系,结合突变的功能预测,鉴定G6PD基因新的突变。结果本研究联合比值法和分子诊断在筛查阳性的患者中共确诊G6PD患儿125例,其中比值法确诊102例,阳性率81.6%,分子诊断确诊123例,突变检出率98.4%。比值法可疑阳性的16例患儿中,分子诊断检出突变11例。113例比值法阴性的标本中检测出突变12例,突变检出率10.6%。基因测序发现2个新突变位点,c.29C＞A和c.361C＞T,其中c.29C＞A的检出率高达7.3%（9/123）,可能成为中国人群G6PD基因一个新的突变热点。结论新生儿G6PD缺乏症活性比值法检测容易漏诊女性杂合子;G6PD基因存在新的突变,且突变热点存在地域差异;基于DNA测序分析的分子诊断是进行新生儿G6PD缺乏症确诊最有价值的方法。