自噬和p53凋亡刺激蛋白在大鼠急性肾损伤模型中的表达及早期诊断价值

摘要

目的观察自噬相关蛋白和p53凋亡刺激蛋白(ASPPs)在肾损伤早期的表达变化,探讨自噬相关蛋白和ASPPs是否可能成为急性肾损伤(AKI)早期损伤生物标志物。方法建立顺铂AKI大鼠模型,将46只雄性SD青年大鼠随机分为假手术组(Sham),顺铂模型组;模型组大鼠一次性腹腔注射顺铂5 mg/kg,Sham组相同途径注射等容量生理盐水;在给药1、3、7、10、14 d时检测大鼠血清肌酐(Scr)、尿素氮(BUN)和胱抑素C(cystatin C,Cys C)水平;光镜观察大鼠肾脏病理变化;透射电镜观察大鼠肾小管上皮细胞超微结构变化及自噬体的情况;免疫印迹法检测肾脏组织LC3、Atg5-Atg12、Beclin 1、LAMP-2、p62、p53及i ASPP和ASPP1表达情况。所有数据采用SPSS 17.0统计软件分析。结果青年大鼠暴露于顺铂1 d时,与Sham组比较,顺铂模型组大鼠Scr、BUN、胱抑素C显著升高(P<0.05);光镜检查发现肾小管损害明显加重;电镜结果显示,顺铂模型组大鼠平均自噬体数量明显增多;顺铂诱导后1 d开始,肾脏组织i ASPP蛋白表达明显减少(P<0.05),Atg5-Atg12、Beclin 1、LAMP-2、p62、p53及ASPP1蛋白表达明显升高(P<0.05)。肾脏组织LC3表达从3 d时明显降低(P<0.05)。结论自噬和ASPPs在AKI发生早期即可出现并参与了AKI的发生发展,在Scr开始升高前,反应性自噬已经启动。自噬相关蛋白和ASPPs有望成为AKI更早期的损伤标志物,可能是AKI早期干预的新靶点,但仍需更深入的研究。