基于SOCS1/STAT3信号通路探讨miR-155对川崎病幼鼠心肌损伤的影响

摘要

目的 基于细胞因子信号转导抑制因子1(SOCS1)/信号传导与转录激活因子3(STAT 3)信号通路探讨微小RNA-155(miRNA-155)对川崎病幼鼠心肌损伤的影响.方法 取30只小鼠,采用干酪乳杆菌胞壁成分(LCWE)诱导川崎病模型,随机分为模型组、抑制组、阴性对照组,各10只,另取10只为正常对照组.抑制组、阴性对照组分别将含有miR-155抑制序列(miR-155-inhibitor)和无义随机序列(miR-155-inhibitor-NC)的质粒脂质体复合物,按每只200μL经尾静脉注入小鼠体内;正常对照组和模型组按每只200μL注射磷酸缓冲盐溶液,干预第1天、第7天分别注射1次.采用定量聚合酶链式反应(qPCR)法检测心肌组织miR-155表达水平,酶联免疫吸附法(ELISA)检测血清心肌肌钙蛋白I(cTnI)、肌酸激酶同工酶(CK-MB)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素-6(IL-6)水平;苏木精-伊红(HE)染色观察心肌组织病理学变化,流式细胞仪检测脾脏Th17/Treg细胞分化情况,qPCR法和免疫印迹法(Western Blotting)检测心肌组织SOCS1 mRNA、STAT3 mRNA和SOCS1、STAT3蛋白及STAT3磷酸化(p-STAT3)蛋白水平.结果 与阴性对照组和模型组比较,抑制组心肌组织miR-155表达水平及血清cTnI、CK-MB、TNF-α、IL-6水平降低(P<0.05);HE染色显示,抑制组心肌纤维较模型组和阴性对照组明显改善;抑制组脾脏Th17细胞占CD4+细胞比例降低,Treg细胞占CD4+细胞比例升高(P<0.05);抑制组SOCS1 mRNA及SOCS1蛋白水平升高,p-STAT3蛋白水平降低(P<0.05).结论 抑制miR-155可改善川崎病引起的心肌损伤,可能通过调控SOCS1/STAT3信号通路进而发挥心肌保护作用.