hTERT启动子介导的PRPS2基因表达下调对胶质瘤U251细胞增殖和凋亡的影响

摘要

目的 探讨人端粒酶逆转录酶(hTERT)启动子介导的磷酸核糖焦磷酸合成酶2(PRPS2)表达下调对胶质瘤U251细胞生长增殖、细胞活力以及细胞周期和凋亡的影响.方法 构建pGGN-hTERT-PRPS2干扰载体及阴性对照载体,转染U251细胞后;采用RT-PCR检测空白对照组、阴性对照组及实验组中PRPS2基因表达情况;采用Cell Counting Kit8细胞增殖试剂盒(CCK-8)检测细胞活力;采用Hoechst 33342染色检测细胞凋亡与坏死情况;进一步通过流式细胞术检测PRPS2对细胞周期和凋亡的影响.结果 阴性对照组(转染阴性对照载体)与空白对照组相比,U251细胞中PRPS2基因表达及各项生物学特性均差异无统计学意义(P＞0.05);实验组(转染pGGN-hTERT-PRPS2干扰载体)与阴性对照组相比,PRPS2表达下调60％,CCK-8结果显示细胞活力明显下降(P＜0.05),Hoechst 33342染色后发现典型凋亡形态细胞,流式细胞术结果发现凋亡率显著上升(P＜0.05),细胞阻滞于G0/G1期(P＜0.05).结论 特异性下调U251细胞中PRPS2的表达,可降低细胞活力、抑制细胞增殖、促进细胞凋亡.