基于蛋白质组学方法研究水蛭干预IgA肾病大鼠的作用机制

摘要

目的:基于蛋白质组学方法检测水蛭对IgA肾病大鼠蛋白指纹图谱影响,阐述水蛭对血瘀证IgAN的作用机理.方法:选用6周龄的Wistar雄性大鼠140只,运用脂多糖牛血清白蛋白+脂多糖+四氯化碳方法建立实验性IgAN模型(空白对照组除外),造模成功后,随机分为(1)空白对照组、(2)模型组、(3)生理盐水对照组、(4)水蛭高剂量治疗组、(5)水蛭中剂量治疗组、(6)水蛭低剂量治疗组、(7)强的松治疗对照组,共7组,每组20只;血液样本经过SDS-PAGE电泳后,进行iTRAQ标记,离线二维液相色谱分离与点靶以及质谱分析及数据库检索对各组样本进行相对定量分析,并利用生物信息学软件进行分析.结果:以p-value<0.05且fold change<0.83或fold change>1.2为差异蛋白筛选标准,血液样本筛选出的21个差异蛋白,血液标本IgAN血瘀证大鼠模型组和空白相比上调,水蛭治疗后下调的蛋白5个,IgAN血瘀证模型组和空白相比下调,水蛭治疗后下调的蛋白16个.结论:应用iTRAQ技术筛选出水蛭治疗后IgAN血瘀证大鼠血液标本中差异表达蛋白,为深入研究IgAN血瘀证的病理机制及水蛭治疗IgA肾病的分子机制奠定了基础.