乙型肝炎病毒囊膜中蛋白与白细胞介素18联合基因免疫

摘要

目的构建HBV囊膜中蛋白核酸疫苗表达载体并免疫小鼠,观察白细胞介素18(IL-18)对基因免疫的辅助作用.方法构建质粒pVR1012-M、pcDNA 3.1-IL-18,肌内注射法免疫25只Balb/c小鼠,3组小鼠分别注射100μgpVR1012,pVR1012-M,pVR1012-M和pcDNA 3.1--IL-18质粒,每2周1次,共3次.每次免疫2周后眼眶采血,检测血清抗-HBs,第3次免疫后2周应用乳酸脱氢酶检测法验证特异性细胞杀伤率.结果经注射上述质粒后,可观察到注射pVR1012-M组的小鼠随免疫次数的增加,抗-HBs阳性率、抗体滴度均逐步增高;同时联用质粒pcDNA 3.1-IL-18的小鼠抗-HBs阳性率、抗体滴度均较单独应用pVR1012-M组为低(第3次免疫后抗-HBs阳性率、抗体滴度两组比较P<0.05).细胞毒性实验证实联用组的细胞杀伤率为(89.02±15.54)%,较单独应用pVR1012-M组(83.08±14.02)%为高,但两组之间差异无显著性.结论注射质粒pVR1012-M可诱导小鼠产生足量的抗-HBs,并可检测出特异性细胞免疫反应;联合应用IL-18对特异性体液免疫有抑制作用,对特异性细胞免疫可能有增强作用.