超氧化物歧化酶复合酶对尘肺患者肺泡巨噬细胞Fas/FasL信号转导及细胞凋亡的调控作用

摘要

目的探讨超氧化物歧化酶（SOD）复合酶对尘肺患者肺泡巨噬细胞（AM）Fas/FasL信号转导及细胞凋亡的调控作用,为尘肺的早期防治提供依据。方法收集在某专科医院进行大容量双肺灌洗治疗的0+接尘工人、Ⅰ期、Ⅱ期尘肺患者（共50例）的肺泡灌洗液中的细胞成分,将每例的AM分为非处理组、SOD组、Fas/FasL组。分别取5×10~6个细胞于DMEM中纯化培养2 h,3组均换新的DMEM,SOD组加SOD复合酶200 U/ml、Fas/FasL组加抗肿瘤坏死因子α（TNF-α）抗体50ng/ml、抗- TRAIL抗体200 ng/ml后继续培养24 h。取1×10~6个AM进行细胞裂解,用western blot方法检测Fas、FasL、Caspases-8、Caspases-3蛋白表达,用quantity one 7.0图像分析软件测定各蛋白的相对含量。采用末端脱氧核酸转移酶（TdT）介导的duTP缺口末端标记技术（TUNEL）检测AM凋亡情况;琼脂糖凝胶电泳法定性检测AM DNA片断化。结果SOD组、Fas/FasL组凋亡指数分别为（9.50±2.76）%和（14.01±2.56）%,均低于未处理组[（19.18±2.83）%],差异有统计学意义（P＜0.05）;未处理组呈现细胞凋亡的特征性DNA梯状带,Fas/FasL组梯状带隐约可见,SOD组未见特征性梯状带。SOD组Ⅰ期、Ⅱ期尘肺患者的Fas、FasL、Caspase-8、Caspase-3蛋白表达水平均低于未处理组和Fas/FasL组,差异有统计学意义（P＜0.05）。不同处理组各期尘肺的AM Fas、FasL、Caspase-8、Caspase-3的蛋白表达水平差异均无统计学意义（P＞0.05）。结论SOD复合酶可下调Fas/FasL系统的Fas、FasL、Caspase-8、Caspase-3的蛋白表达水平,抑制AM的凋亡。