二氧化硅刺激矽肺肺泡巨噬细胞上清介导的人胚肺成纤维细胞Ⅲ型胶原和Ⅲ型前胶原的表达

摘要

目的探讨经SiO2刺激的肺泡巨噬细胞（AM）通过人胚肺成纤维细胞（HELF）对Ⅲ型胶原（CⅢ）和Ⅲ型前胶原（pCⅢ）表达的影响及抗TGF-β1抗体的干预作用。方法收集矽肺患者AM,将其分为加入SiO2粉尘悬液的处理组和仅加入无血清培养液的对照组。培养18 h后获取培养上清。将原代培养的HELF分为:（1）处理组:加入经SiO2刺激的AM上清;（2）对照组:加入未经SiO2刺激的AM上清;（3）空白对照组:仅加入含体积分数为3%胎牛血清的DMEM;（4）处理组+抗转化生长因子β.（TGF-β1）抗体干预组:在处理组的基础上加上抗TGF-β1抗体（10 μg/ml）;（5）对照组+抗TGF-β1抗体干预组:在对照组的基础上加上抗TGF-β1抗体（10μg/m1）。前3组分别培养6、12、18、24、36、48 h,后2组分别培养18、24、36 h,用免疫细胞化学法检测HELF中pCⅢ的表达,用免疫印迹（Western blot）法检测HELF条件培养上清中CⅢ的表达。结果与对照组（0.1212±+0.0079、0.1414±0.0058、0.1620±0.0081、0.1965±0.0103、0.1715±0.0116）相比,处理组12、18、24、36和48 h pCⅢ表达（0.1423±0.0107,0.1624±0.0011,0.1925±0.0056,0.2421±0.0097,0.2102±0.0103）明显升高,差异有统计学意义（P＜0.05或P＜0.01）。与对照组（0.2296±+0.0121、0.2778±0.0116、0.3367+0.0269、0.3722±±0.0214）相比,处理组12、18、24、36、48 h CⅢ含量（0.2559±0.0061、0.3249±0.0110、0.4171±0.0193、0.5441±0.0452、0.4751±0.0252）明显增高,差异均有统计学意义（P＜0.05或P＜0.01）。与同期相对应的非干预组相比,18、24、36 h抗TGF-β1抗体干预组CⅢ和pCⅢ均明显降低,差异均有统计学意义（P＜0.01或P＜0.05）。结论 SiO2经AM的介导,诱导HELF高表达CⅢ和pCⅢ,部分效应是通过TGF-β1起作用。