香叶木素通过NF-κB通路缓解IL-1β诱导的新生大鼠骨关节炎软骨细胞凋亡和免疫反应

摘要

目的:本研究旨在探索香叶木素对IL-1β诱导的新生大鼠骨关节炎软骨细胞凋亡及免疫反应的影响及其分子机制.方法:软骨细胞分为4组:对照组;香叶木素(20μmol/L)组;IL-1β(50 ng/ml)组;Diosm(20μmol/L)+IL-1β(50 ng/ml)组.流式细胞术检测细胞凋亡.蛋白印迹分析Ⅱ型胶原、基质金属蛋白酶-13(MMP-13),蛋白聚糖、NF-κB P65和p-NF-κB P65蛋白水平.ELISA检测一氧化氮(NO)、前列腺素E2(PGE2)和肿瘤坏死因子-α(TNF-α)水平.免疫荧光染色观察NF-κB P65细胞定位.结果:香叶木素可改善IL-1β诱导的新生大鼠骨关节炎软骨细胞变形及细胞数目的下降.IL-1β组细胞凋亡率明显高于对照组(P<0.05).与IL-1β组相比,Diosm+IL-1β组细胞凋亡率明显下降(P<0.05).与对照组相比,IL-1β组Ⅱ型胶原和蛋白聚糖蛋白水平下降,MMP-13蛋白水平上升(P<0.05).与IL-1β组相比,Diosm+IL-1β组Ⅱ型胶原和蛋白聚糖蛋白水平升高,MMP-13蛋白水平降低(P<0.05).而且,IL-1β组NO、PGE2和TNF-α水平高于对照组(P<0.05).Diosm+IL-1β组NO、PGE2和TNF-α水平低于IL-1β组(P<0.05).与对照组相比,IL-1β组p-P65/P65上升(P<0.05).Diosm+IL-1β组p-P65/P65低于IL-1β组(P<0.05).另外,香叶木素会降低IL-1β诱导的新生大鼠骨关节炎软骨细胞NF-κB P65从细胞质向细胞核的转运.结论:香叶木素通过抑制NF-κB通路活化缓解IL-1β诱导的新生大鼠骨关节炎软骨细胞凋亡和免疫反应.