从人源单链抗体库中筛出具有抗原结合活性的重链可变区和更小抗体片段

摘要

目的:用噬菌体呈现技术结合体外致敏法构建了人源单链抗体库,并用大肠癌相关抗原CA-Hb3筛选出抗大肠癌噬菌体抗体克隆EL5D、EL6D和Ca12,测定3个克隆的核苷酸序列,并研究其免疫活性.方法:采用抗体克隆扩增、测序分析、免疫组化法测定活性.结果:抗体基因插入片段分别为220、500、500 bp.测序结果表明,EL6D和Ca12属VH5-D-JH4,仅为VH结构亚单位,而EL5D属Vκ的Jκ1,仅为FR3-CDR3-FR4结构.三者均能与人结直肠癌细胞和组织反应,与其亲本鼠源单抗Hb3的结合特性一致.3个抗体克隆已列入国际基因库,序号为AF051165-AF051167.结论:短的人源抗体片段具有潜在临床应用价值.