雷公藤甲素预处理诱导Tregs细胞减轻小鼠肝脏缺血再灌注损伤的实验研究

摘要

目的探讨雷公藤甲素（TPT）预处理减轻小鼠肝脏缺血再灌注损伤的作用及其机制。方法将C57BL/6小鼠随机分为4组（15只/组）:假手术对照组;假手术雷公藤甲素组;实验对照组;雷公藤甲素实验组。两个雷公藤甲素组小鼠术前1周每天给予雷公藤甲素0.1 mg/kg腹腔注射,术前1 h加用一次,而两对照组同期仅给予等体积无菌生理盐水腹腔注射。肝脏缺血90 min再灌注24 h后分别采集各组小鼠的血液和肝组织,检测血清丙氨酸转移酶（ALT）、天冬氨酸转移酶（AST）水平。以及肝脏组织丙二醛（MDA）和超氧化物歧化酶（SOD）含量。光镜下观察肝组织的病理学变化。采用流式细胞术检测肝组织中CD4+CD25+Foxp3+T淋巴细胞占CD4+T细胞的百分比,采用实时聚合酶链反应检测肝组织中Foxp3 mRNA的表达。采用酶联免疫吸附试验检测血清中IL-10、IL-6、IL-1β和TNF-α细胞因子含量。结果雷公藤甲素实验组和实验对照组小鼠血清ALT和AST明显升高,且雷公藤甲素实验组水平低于实验对照组（P＜0.05）。假手术雷公藤甲素组和雷公藤甲素实验组与相应假手术和实验对照组相比MDA含量降低,SOD活性升高（P＜0.05）。两假手术组肝组织结构正常,实验对照组可见明显的肝组织片状坏死,雷公藤甲素实验组肝小叶结构基本正常。假手术对照组、假手术雷公藤甲素组、实验对照组和雷公藤甲素实验组CD4+CD25+Foxp3+T淋巴细胞占CD4+T细胞的百分比分别为（7.55±1.87）%、（12.59±3.87）%、（7.85±1.07）%和（12.02±3.16）%。假手术雷公藤甲素组和雷公藤甲素实验组Foxp3 mRNA相对表达量高于相应的对照组（P＜0.05）。雷公藤甲素实验组较实验对照组相比有升高血清IL-10,降低IL-6、IL-1β和TNF-α细胞因子的含量的作用。结论雷公藤甲素可减轻小鼠肝脏缺血再灌注损伤,其机制可能与雷公藤甲素诱导上调体内CD4+CD25+Foxp3+调节性T淋巴细胞比例及增加IL-10分泌,抑制IL-6、IL-1β和TNF-α炎症细胞因子有关。