miR-149靶向调控CARM1基因对直肠癌细胞放疗敏感性

摘要

目的 研究miR-149对直肠癌细胞活性、凋亡及辐照敏感性的影响及作用机制.方法 运用实时荧光定量聚合酶链反应(qRT-PCR)检测人结直肠上皮细胞HCEpiC、直肠癌细胞HT29中miR-149的表达;将miR-con组(转染miR-con)、miR-149组(转染miR-149 mimics)、miR-149+pcDNA组(共转染miR-149 mimics和pcDNA)、miR-149+pcDNA-共激活相关精氨酸甲基转移酶(CARM)1(共转染miR-149 mimics和pcDNA-CARM1)、IR+miR-con组(转染miR-con)、IR+miR-149组(转染miR-149 mimics)、IR+miR-149+pcDNA组(共转染miR-149 mimics和pcDNA)、IR+miR-149+pcDNA-CARM1(共转染miR-149 mimics和pcDNA-CARM1)均用脂质体法转染至HT29细胞,各IR组再进行4 Gy照射;噻唑盐(MTT)法检测各组细胞的活性;Western印迹检测各组细胞中CARM1、B细胞淋巴瘤(Bcl-2)、Bcl-2相关X蛋白(Bax)的表达;流式细胞术检测各组细胞的凋亡;克隆形成试验检测各组细胞的存活分数;双荧光素酶报告基因检测实验检测各组细胞的荧光活性.结果 与人结直肠上皮细胞HCEpiC组相比,直肠癌细胞HT29中miR-149表达明显下调,CARM1表达明显上调(P<0.05);过表达CARM1可逆转过表达miR-149对HT29细胞的活性抑制,凋亡促进及辐照增敏作用.miR-149可抑制野生型CARM1细胞的荧光活性,又可负向调控CARM1的蛋白表达.结论 miR-149可抑制直肠癌细胞的活性,促进细胞凋亡,增强其对放射治疗的敏感性,其机制可能与靶向CARM1有关.