低温对小鼠N2a细胞氧糖剥夺复糖复氧模型3-羟基-3-甲基戊二酰裂解酶的影响

摘要

目的观察低温对小鼠神经母细胞瘤(N2a)细胞氧糖剥夺复糖复氧(OGD/R)模型3-羟基-3-甲基戊二酰裂解酶(HMGCL)的影响。方法将生长状态良好的N2a细胞随机分为对照组、模型组和低温组,后2组建立氧糖剥夺模型3h后,模型组复糖复氧48 h,低温组于32℃复糖复氧24 h,再正常条件培养24 h。各组细胞于OGD/R模型24 h和48 h,用Hoechst33258荧光染色观察细胞凋亡,细胞计数试剂盒检测细胞存活率,分光光度法检测半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶3(Caspase-3)活性,Western blot法检测HMGCL表达。结果对照组24 h和48 h几乎没有凋亡细胞。与对照组比较,模型组和低温组24 h和48 h凋亡细胞数增多,细胞存活率降低[(47.13±4.20)%和(63.94±5.21)%vs(100.00±0.00)%,(60.39±1.16)%和(68.27±3.16)%vs(100.00±0.00)%,P<0.05],Caspase-3活性升高(3.88±0.40和2.17±0.39 vs 1.00±0.00,3.65±0.11和2.17±0.14 vs 1.00±0.00,P<0.05),HMGCL相对表达量升高(1.24±0.05和0.96±0.03 vs 0.78±0.03,1.18±0.02和0.95±0.04 vs 0.69±0.03,P<0.05);与模型组比较,低温组24 h和48 h凋亡细胞数减少,细胞存活率升高(P<0.05),Caspase-3活性降低(P<0.05),HMGCL相对表达量降低(P<0.05)。结论低温可以减轻N2a细胞OGD/R模型损伤,该机制可能与抑制HMGCL表达,降低Caspase-3活性,减少细胞凋亡有关。