微小RNA-204抑制剂基因修饰的骨髓间充质干细胞在外伤性脑出血神经功能恢复中的作用

摘要

目的 探究微小RNA(miR)-204抑制剂(inhibitor)基因修饰的骨髓间充质干细胞(BMSC)在创伤性脑出血(TICH)大鼠神经功能恢复中的作用.方法 选择30只SD大鼠通过击打的方法建立TICH模型,磁共振和Lon-ga评分法评估建模结果.建模成功大鼠随机分为TICH组、TICH+BMSC组和TICH+inhibitor-BMSC组,每组8只.另选择8只健康SD大鼠作为对照组.TICH+BMSC组通过尾静脉注射BMSC(1 μl,1×105个);TICH+inhibitor-BMSC组尾静脉注射转染miR-204 inhibitor的BMSC(1 μl,1×105个);TICH组注射等量的磷酸盐缓冲液,1次/d,连续7d.对照组大鼠仅钻孔.在建模后和干预后通过水迷宫视频跟踪分析系统分析大鼠神经功能.将BMSC细胞分为NC组和类似物(mimic)组,并分别通过质粒转染NC和miR-204 mimic.结果 与对照组比较,建模后TICH组、TICH+BMSC组和TICH+inhibitor-BMSC组大鼠的逃避潜伏期显著升高,而穿越平台次数显著降低(P＜0.05).干预后,TICH组的逃避潜伏期高于对照组,穿越平台次数低于对照组(P＜0.05);TICH+BMSC组和TICH+inhibitor-BMSC组的逃避潜伏期均短于TICH组,穿越平台次数高于TICH组(P＜0.05).TICH组脑组织中的凋亡细胞数目显著高于对照组[(31.58±3.72)个vs(2.13±0.41)个,P＜0.05],TICH+BMSC组和TICH+inhibitor-BMSC组凋亡细胞数目显著少于TICH 组[(19.73±2.56)个、(11.04±2.16)个vs(31.58±3.72)个,P＜0.05].与对照组比较,TICH组大鼠脑组织中miR-204显著升高,胶质细胞源性神经营养因子(GDNF)mRNA和GDNF蛋白显著降低(P＜0.05).过表达miR-204后,与NC组比较,mimic组miR-204显著增高,GDNFmRNA和GDNF蛋白水平显著降低(P＜0.05).结论 miR-204 inhibitor基因修饰的BMSC会使GDNF的水平上调,抑制神经元凋亡和保护神经元功能,从而促进TICH模型大鼠神经功能的恢复.