FGF2和VEGF对食管鳞癌、腺癌荷瘤裸鼠肿瘤组织结构血管、灌注血管及缺氧程度的影响分析

摘要

目的探索FGF2及VEGF对食管癌结构血管和灌注血管的影响,阐明与食管癌快速生长、转移密切相关的血管生成调节机制.方法本实验采用人食管癌细胞系TE-1(鳞状细胞癌),SEG-1和BIC-1(腺癌)及其荷瘤动物模型.利用体外细胞培养技术观察重组人FGF2、VEGF对三种细胞系生长增殖的影响,采用多探针RNA酶保护性分析方法检测FGF2和VEGFmRNA水平,采用免疫组织化学和免疫荧光方法观察食管癌组织结构血管、灌注血管密度及瘤内缺氧程度的影响.结果①体外细胞培养实验中,不同浓度FGF2(10ng,100ng)对人食管癌细胞系TE-1,SEG-1和BIC-1的增殖速度和生长曲线无影响.②FGF2和VEGFmRNA基础水平的定量检测显示食管鳞癌细胞系TE-1的FGF2为4.92,VEGF为57.57.食管腺癌细胞系SEG-1的FGF2、VEGF分别为49和53.62;BIC-1不表达FGF2,VEGF为17.04.③在TE-1、SEG-1、BIC-1三种食管癌荷瘤裸鼠模型中,FGF2、VEGF对食管癌结构血管(CD31)以及灌注血管(DIOC7)平均距离的影响分析显示:VEGF处理组结构血管和灌注血管密度较对照组显著增加(P＜0.05),FGF2处理组结构血管和灌注血管密度在SEG-1模型中显著增加(P＜0.05).④在TE-1和BIC-1模型中,FGF2处理组EF5/Cy3染色的平均强度与对照组无明显差别,VEGF处理组EF5/Cy3染色的平均强度明显降低.在SEG-1模型中,两个处理组均无明显变化.结论①不同组织类型食管癌中FGF2的表达不同,甚至同一组织类型不同细胞系也存在较大的差异性,VEGF在不同组织类型食管癌中均有高水平表达.②食管癌肿瘤细胞对外源性FGF2的反应可能与自身FGF2mRNA表达水平有关.③FGF2在食管癌SEG-1(腺癌)促进肿瘤生长是通过促进血管生成这一途径实现的.在某些食管癌中,如TE-1(鳞癌)和BIC-1(腺癌),它既无刺激食管癌细胞增殖也无促进血管生成的作用.VEGF可显著增加结构血管和灌注血管,改善瘤内缺氧程度.VEGF是食管癌血管生成的重要凋节因子.④对食管癌肿瘤组织内同一部位结构血管(CD31)、灌注血管(DIOC7)和瘤内缺氧程度(EF5)同时进行检测,有助于血管密度与血管功能关系的评价,是一种较好的研究方法.