甲状腺素及丙硫氧嘧啶对人脐静脉内皮细胞一氧化氮合酶表达的影响

摘要

目的探讨甲状腺素(T4)及丙硫氧嘧啶(PTU)对人脐静脉内皮细胞(HUVEC细胞)一氧化氮合酶表达的影响。方法体外培养HUVEC细胞,实验分为6组,分别为对照组(未加T4及PTU),10^-9、10^-7、10^-4 mol/L T4组,PTU组(5μg/ml PTU),10^-4 mol/L T4+PTU组,作用时间为24 h。采用CCK-8法检测细胞活性;硝酸还原酶法检测细胞培养液一氧化氮(NO)、总一氧化氮合酶(TNOS)、内皮型一氧化氮合酶(eNOS)含量;蛋白质印迹法检测eNOS蛋白表达水平。结果6组细胞存活率[(100.00±0.00)%、(96.73±1.17)%、(86.20±7.54)%、(47.37±9.10)%、(53.37±5.47)%、(53.40±8.84)%]比较差异有统计学意义(F=29.42,P<0.05);与对照组比较,10^-7、10^-4 mol/L T4组,PTU组和10^-4 mol/L T4+PTU组细胞存活率显著降低(P均<0.05)。6组细胞培养液NO、TNOS含量比较差异有统计学意义(F=3.93、3.46,P均<0.05);与对照组比较,PTU组TNOS含量显著降低(P<0.05);与10^-4 mol/L T4组比较,PTU、10^-4 mol/L T4+PTU组NO含量显著降低(P均<0.05)。6组细胞培养液eNOS含量及蛋白表达水平比较差异无统计学意义(F=0.24、0.17,P均>0.05)。结论高浓度T4可造成体外培养HUVEC细胞活性的损伤,PTU通过调节NO、TNOS起到对其的缓解作用,具体作用机制还需进一步分子生物实验的深入研究。