白念珠菌对人急性单核细胞白血病细胞系产生肿瘤坏死因子α、活化信号分子p38MAPK的影响

摘要

目的探讨白念珠菌对人急性单核细胞白血病细胞系（THP-1细胞系）分泌肿瘤坏死因子α（TNF-α）和细胞内信号分子p38丝裂原活化蛋白激酶（MAPK）激活的影响。方法实时荧光定量PCR分析105、106 CFU/ml灭活白念珠菌及阳性刺激物脂多糖刺激THP-1细胞1、3、6 h后TNF-α mRNA表达水平变化。40 μg/L地塞米松预先与THP-1细胞共培养30 min后, 再用106 CFU/ml白念珠菌、脂多糖刺激6 h后检测TNF-α mRNA表达水平。酶联免疫吸附法检测白念珠菌刺激THP-1细胞24 h后TNF-α分泌量。免疫印迹法分析白念珠菌体外作用THP-1细胞30 min、1 h后p38MAPK和磷酸化p38MAPK的水平。结果 105 CFU/ml白念珠菌、106 CFU/ml白念珠菌、脂多糖刺激THP-1细胞组以及空白对照组TNF-α mRNA表达水平差异有统计学意义（F=110.98,P＆ 0.001）;白念珠菌刺激1、3、6 h之间差异也有统计学意义（F=701.680,P＆ 0.001）, 随培养时间延长, THP-1细胞TNF-α mRNA水平增高, 呈时间依赖效应。106 CFU/ml白念珠菌刺激THP-1细胞后24 h, TNF-α蛋白水平（6385.70±533.99 ng/L）较空白对照组（147.10±0.53 ng/L）明显升高, 差异有统计学意义（P＆ 0.01）。106 CFU/ml白念珠菌作用于THP-1细胞30、60 min后磷酸化p38MAPK蛋白水平也明显升高。40 μg/L地塞米松预先与THP-1细胞共培养30 min后, 再以106 CFU/ml白念珠菌刺激6 h后TNF-α mRNA表达水平（3.77±0.62）较未用地塞米松组（208.50±10.50）明显降低, 地塞米松可阻断白念珠菌上调TNF-α mRNA水平。结论人THP-1细胞体外与白念珠菌作用后激活信号分子p38MAPK并分泌TNF-α, 参与抗念珠菌感染固有免疫反应。