转基因盐藻防龋疫苗的基础研究1-超声转化编码嵌合体SBR-CTΔA1基因

摘要

目的:构建含编码嵌合体SBR-CTΔA1基因的转基因盐藻防龋疫苗.方法:观察野生型盐藻对除草剂草丁膦的敏感性,确定合适的筛选浓度;采用超声法将含编码嵌合体SBR-CTΔA1基因的植物表达质粒pROSB转化盐藻细胞,PCR法和Southern杂交技术筛选转基因盐藻,RT-PCR检测外源基因转录情况.结果:①野生型盐藻对草丁膦具有敏感性,固体培养基中浓度为8 mg/L的草丁膦和液体培养基中浓度为6 mg/L的草丁膦可以抑制盐藻的生长,是合适的筛选浓度;②获得转基因藻株,提取基因组DNA进行PCR分析,得到1.9 kb片段;进行Southern杂交分析,获得阳性信号条带;提取总RNA进行RT-PCR分析,部分藻株获得1.9 kb条带.结论:获得整合有目的基因且可以正常转录的转基因盐藻藻株,为研制安全、经济、高效的防龋疫苗提供工作基础.