LC-MS/MS法同时测定人血浆中阿托伐他汀及其活性代谢物的浓度

摘要

目的建立LC-MS/MS法测定人血浆中阿托伐他汀及其主要活性代谢物2-羟基阿托伐他汀和4-羟基阿托伐他汀的浓度。方法分别以阿托伐他汀-d5,2-羟基阿托伐他汀-d5和4-羟基阿托伐他汀-d5为内标,加入5%甲酸水溶液,用甲基叔丁基醚进行液液萃取后,进样分析。色谱柱为CAPCELL PAK C_(18)(2 mm×100 mm,TYPE:MGⅡ,5μm),流动相为乙腈-5 mmol·L^(-1)乙酸胺水溶液-甲酸=46:54:0.143,流速为0.40 mL·min^(-1)。电喷雾离子源:正离子多反应监测扫描分析。阿托伐他汀的离子对为m/z 559.3→m/z 440.2,2/4-羟基阿托伐他汀的离子对为m/z 559.3→m/z 440.2。考察其专属性、标准曲线与定量下限、准确度和精密度、提取回收率和基质效应、残留效应和稳定性。结果血浆中阿托伐他汀的标准曲线方程为y=4.35×10^(-2)x+3.43×10^(-4)(r=0.9993),在0.05~100 ng·mL^(-1)线性关系良好,定量下限为0.05ng·mL^(-1);2-羟基阿托伐他汀的标准曲线方程为y=1.03×10^(-1)x+6.93×10^(-4)(r=0.998 7),在0.05~50 ng·mL^(-1)线性关系良好,定量下限为0.05ng·mL^(-1);4-阿托伐他汀的标准曲线方程为y=5.35×10^(-1)x-2.26×10^(-3)(r=0.9984),在0.05~5.0 ng·mL^(-1)线性关系良好,定量下限为0.05ng·mL^(-1)。阿托伐他汀、2-羟基阿托伐他汀和4-羟基阿托伐他汀的日内、日间的相对标准偏差(RSD)均小于15%;提取回收率为61.64%~90.29%;基质效应为88.74%~105.62%。结论 LC-MS/MS法快速、灵敏、准确、选择性强、重复性好,适用于人血浆中阿托伐他汀及其活性代谢产物的浓度测定,可以满足临床药物浓度监测以及药代动力学研究的需要。