miR-329靶向调控细胞周期相关转录因子基因逆转非小细胞肺癌A549细胞顺铂耐药的机制研究

摘要

目的探究miR-329靶向调控细胞周期相关转录因子(E2F1)基因对非小细胞肺癌A549细胞顺铂(DDP)耐药的影响。方法将DDP耐药细胞株A549/DDP细胞分为空白组(细胞未经任何处理)、对照组(转染miR-329-mimics-NC)和实验组(转染miR-329-mimics)。用实时荧光定量聚合酶链反应法测定miR-329和E2F1 mRNA的表达水平,用细胞计数试剂盒-8法检测细胞增殖情况,用蛋白质印迹法检测E2F1蛋白、重组人叉头框蛋白L2(FOXL2)和整合素α2(ITGA2)蛋白的表达情况。结果A549细胞和A549/DDP细胞的miR-329相对表达水平分别为1.00±0.16和0.53±0.08,差异有统计学意义(P<0.05)。实验组、对照组和空白组的miR-329相对表达水平分别为1.68±0.26,1.02±0.16和1.00±0.15,E2F1 mRNA相对表达水平分别为0.33±0.05,1.01±0.15和1.00±0.16,细胞增殖抑制率分别为(28.95±4.33)%,(14.03±2.10)%和(13.26±1.98)%,半抑制浓度分别为(28.40±1.72),(47.85±5.71)和(45.63±3.18)μmol·L^(-1),E2F1蛋白相对表达水平分别为0.37±0.11,0.82±0.13和0.79±0.12,FOXL2蛋白相对表达水平分别为0.53±0.08,0.90±0.1和0.87±0.13,ITGA2蛋白相对表达水平分别为0.45±0.07,0.93±0.14和0.91±0.15。实验组的上述指标与空白组和对照组比较,差异均有统计学意义(均P<0.05)。结论过表达miR-329可靶向下调E2F1基因表达,抑制非小细胞肺癌A549细胞顺铂耐药性,其可能是通过抑制FOXL2/ITGA2通路活化实现的。