转染外源性Fas配体基因的正常骨髓CD34+细胞诱导U937细胞凋亡的实验研究

摘要

目的:观察转染外源性FasL的CD34+细胞对白血病细胞系U937的凋亡诱导作用,探讨通过向CD34+细胞转染FasL以增强移植后GVL效应的可能性.方法:免疫磁珠法分选骨髓CD34+细胞并进行体外扩增培养;FasL基因逆转录病毒途径转染CD34+细胞,并与白血病细胞U937混合培养,加入或不加入柔红霉素、阿糖胞苷,借助TUNEL、流式细胞仪检测细胞的凋亡率.结果:逆转录病毒上清转染后48～72h,流式细胞仪检测24.2%±2.4%CD34+细胞表达FasL(P＜0.01)(未转染的CD34+细胞FasL阳性率为7.6%±1.1%).未转染或转染外源FasL的CD34+细胞与白血病细胞U937以1:1的比例混合培养18h后,细胞凋亡率分别为5.0%±1.3%、10.8%±0.6%(P＜0.01);FasL+CD34++DNR或FasL+CD34++Arac作用后,细胞凋亡率分别为13.4%±1.0%(P＜0.05)、17.95%±1.3%(P＜0.01).结论:表达外源性FasL的骨髓CD34+细胞可诱导白血病细胞U937凋亡.提示植入转染外源性FasL基因的骨髓CD34+细胞可增强BMT后的GVL效应.