高表达CXCR4可通过乳酸脱氢酶A磷酸化诱导肺腺癌细胞产生吉非替尼耐药

摘要

目的:探讨CXC趋化因子受体4(CXCR4)高表达诱导肺腺癌细胞产生吉非替尼耐药的潜在机制.方法:检测含EGFR-19del点突变的肺腺癌细胞中CXCR4的表达情况,以siRNA干扰或慢病毒感染调控细胞CXCR4的表达,通过克隆形成、CCK-8、流式细胞凋亡术、细胞凋亡相关蛋白测定、裸鼠皮下成瘤等实验鉴定细胞的吉非替尼敏感性.采用免疫共沉淀结合质谱分析法筛选CXCR4的相互作用蛋白.检测细胞的有氧糖酵解水平,并检测细胞在糖酵解抑制剂处理下的吉非替尼敏感性.结果:PC9/GR细胞存在显著的吉非替尼耐药性,PC9/GR细胞的吉非替尼IC50是PC9细胞的近100倍(19.15μmol/L vs 0.195μmol/L).CXCR4在PC9/GR细胞中高表达(＞4倍高于PC9细胞),抑制CXCR4可显著逆转PC9/GR细胞的耐药性.过表达CXCR4可诱导PC9细胞产生耐药,使吉非替尼IC50由0.89 μmol/L升高至10.10 μmol/L.乳酸脱氢酶A(lactate dehydrogenase A,LDHA)是新型CXCR4底物:CXCR4过表达通过促进LDHA磷酸化,从而增强细胞的有氧糖酵解功能;糖酵解抑制剂可显著逆转CXCR4高表达所诱导的吉非替尼耐药.结论:CXCR4高表达通过促进LDHA磷酸化使有氧糖酵解功能增强,从而诱导肺腺癌细胞产生吉非替尼耐药,是潜在的吉非替尼耐药治疗靶点.