骨桥蛋白在肝癌细胞耐受失巢凋亡中的作用

摘要

目的:探讨骨桥蛋白(osteopontin,OPN)在肝癌高转移细胞系MHCC-97H耐受失巢凋亡中的作用,以进一步明确OPN促进肝癌转移的机制.方法:MHCC-97H在悬浮培养条件下,观察其对失巢凋亡的敏感性.经体外化学合成骨桥蛋白序列特异性的RNAi分子(RNAi1、RNAi2、RNAi3),用脂质体(lipofectamine)转染MHCC-97H肝癌细胞系,用Western blot法检测其抑制OPN的表达的作用以及诱导失巢凋亡的作用.用流式细胞仪检测失巢凋亡情况(Annexin V/PI双染色法).结果:在悬浮培养条件下,MHCC-97H耐受失巢凋亡.特异性的OPN RNAi转染MHCC-97H细胞后,OPN蛋白表达被显著抑制.与对照组相比,特异性RNAi转染组细胞悬浮培养72h后,凋亡率显著增加(P<0.05).结论:OPN介导耐受失巢凋亡是高转移潜能肝癌细胞发生转移的机制之一.