不同程度颈动脉狭窄对大鼠认知功能及海马CA1区神经元凋亡的影响

摘要

目的：探讨不同程度颈动脉狭窄对大鼠认知功能及海马CA1区神经元凋亡的影响，分析认知障碍发生的可能机制。方法将50只成年雄性Wistar 大鼠按随机数字表法，随机分为假手术组、单侧轻度狭窄组、单侧中度狭窄组、单侧重度狭窄组、双侧轻度狭窄组、双侧中度狭窄组、双侧重度狭窄组及假手术组。采用“针控线栓法”制作不同狭窄程度的大鼠颈动脉狭窄模型，运用水迷宫定位航行及空间搜索试验评估不同程度颈动脉狭窄大鼠认知功能；采用免疫组织化学法，在光镜下观察海马CA1区p75神经营养素受体（p75NTR）、Bax、Bcl-2、神经营养因子-3（NT-3）、神经生长因子（NGF）阳性细胞数，观察神经元凋亡情况。结果50只大鼠中，死亡6只，1只大鼠健康状况不佳未能完成水迷宫试验，1只大鼠双侧颈动脉狭窄程度未能同时符合30％～60％，均予以剔除，余42只大鼠，每组6只。（1）与假手术组比较，单侧重度狭窄组、双侧中度狭窄组及双侧重度狭窄组平均逃避潜伏期延长[分别为（39±6）、（32±5）、（69±7）s比（23±4）s，均P ＜0．01]，平台象限游泳距离百分比减少[分别为（35±4）％、（44±4）％、（22±5）％比（53±7）％，均P ＜0．01]，且认知功能随狭窄程度加重而下降。双侧重度狭窄组较单侧重度狭窄组平均逃避潜伏期延长及平台象限游泳距离百分比减少（P ＜0．01）。（2）与假手术组Bax、p75NTR、Bcl-2阳性细胞数[分别为（8．8±3．1）、（4．2±2．3）、（5．8±1．8）个]比较，单侧重度狭窄组、双侧中度狭窄组及双侧重度狭窄组Bax、P75NTR、Bcl-2阳性细胞数增加[分别为（25．5±3．5）、（11．0±2．2）、（12．3±2．7）个；（15．8±3．7）、（8．9±2．2）、（10．5±2．9）个；（47．9±6．3）、（24．7±3．0）、（12．8±2．5）个，均P ＜0．01]， Bax、p75NTR阳性细胞数随狭窄程度增加而上升。重度狭窄时，双侧重度狭窄组Bax、p75NTR 阳性细胞数较单侧重度狭窄组增加（P ＜0．01）。NGF、NT-3阳性细胞数各狭窄组较假手术组有升高趋势，但差异无统计学意（ F值分别为1．034、1．358，P值分别为0．420、0．259）。结论颈动脉狭窄可引起大鼠认知功能障碍，且与颈动脉狭窄程度有关，缺血所致海马CA1区神经元凋亡可能是大鼠颈动脉狭窄后出现认知障碍的机制之一。