Akt/eNOS信号途径调节内皮祖细胞存活和功能的实验研究

摘要

目的研究 Akt/eNOS 信号途径是否调节内皮祖细胞（EPC）的存活和功能。方法分离、培养 EPC,然后与不同浓度氧化型低密度脂蛋白（oxLDL）、硝基精氨酸甲酯（L-NAME）或triciribine 孵育48 h,一部分 EPC 与左旋精氨酸预处理后,再与 oxLDL 孵育。然后,检测 EPC 凋亡率及迁移、黏附和管状结构形成能力,同时检测磷酸化 Akt 的蛋白表达、内皮型一氧化氮合酶（eNOS）的蛋白及 mRNA 表达、一氧化氮的产生。结果 oxLDL 剂量依赖性地诱导 EPC 凋亡,抑制 EPC 迁移、黏附及管状结构形成能力,L-NAME 和 triciribine 具有与 oxLDL 相似的作用。oxLDL 的作用能被左旋精氨酸抑制。oxLDL 降低磷酸化 Akt 及 eNOS 蛋白表达,oxLDL 剂量为50μg/ml 时下降率分别为（66±4）%和（68±9）%。而且,oxLDL 降低 EPC eNOS mRNA 的表达及一氧化氮的产生,oxLDL 剂量为50μg/ml 时 eNOS mRNA 表达的下降率为（59±14）%。结论 oxLDL 通过调节 Akt/eNOS 信号途径调节 EPC 的存活和功能。