UCN-01去除放射后肿瘤细胞G_2期阻滞及其相关机制

摘要

背景与目的:辐射对肿瘤细胞的影响常表现为细胞周期的改变。本研究观察X线照射后肿瘤细胞G2期阻滞及药物UCN鄄01去除此阻滞的情况,并进一步研究其相关机制。方法:选用已知p53突变的人鼻咽癌CNE鄄1细胞系和人肺腺癌973细胞系进行研究,并以p53功能正常的人纤维母细胞瘤HT鄄1080细胞系作为对照。采用细胞培养和流式细胞仪技术分析X线照射对以上细胞系的细胞周期的影响,并观察UCN鄄01对放射后细胞G2期阻滞的影响;应用蛋白印迹法(Westernblot)测定在UCN鄄01去除CNE鄄1细胞G2期阻滞的过程中,细胞内磷酸化CDC2鄄Tyr15含量的相应变化。结果:X线照射明显导致CNE鄄1细胞和973细胞G2阻滞,照射2Gy后两组的G2期细胞比例分别由18.4%和14.8%上升至43.6%和42.8%,两组细胞的G1期阻滞不显著,衡量G1期阻滞的指标“S期消耗率”均较低,分别为14.8%和-1.2%,明显低于p53功能正常的HT鄄1080细胞(57.0%)。UCN鄄01能够去除放射后CNE鄄1细胞和973细胞G2阻滞,两组的G2期细胞比例分别从单纯照射组的63.5%和35.4%降至16.1%和16.3%。CNE鄄1细胞照射后随着细胞G2期阻滞增加,磷酸化CDC2鄄Tyr15的含量相应增加,而UCN鄄01能够降低照射后细胞内磷酸化CDC2鄄Tyr15的含量,并与该药去除细胞G2期阻滞的过程相一致。